流式非特异性荧光的照妖镜-同型对照

什么是同型对照 同型对照是指与检测抗体相同种属来源、相同亚型、相同荧光标记,但对目标靶点没有特异性结合的抗体。它能让非特异性荧光现原形,从而得到真正的阳性目的细胞群。 同型对照的作用 衡量抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色情况。 为何需要同型对照 我们都知道抗体是由Fab和Fc构成的(Y字型),其中Fab端是可变区域,能与抗原特异性结合,而Fc端是恒定的,它可以和我们表达Fc受体的细胞非特异结…

五颜六色的真空采血管,你用对了吗?

血清和血浆是ELISA实验中最常用的样本类型,那如何从“赤橙黄绿青蓝紫黑灰”的采血管中挑选适合采集血清血浆的采血管呢?9种颜色头盖的采血管个个身怀绝技,有什么不同和用途呢?别急!小科给您支妙招! ELISA实验前血清和血浆的制备: 血清样本:用红管或橘红色管收集全血。血样凝集30分钟后,1,000× g 离心10分钟,取上清,对上清进行分装保存。-20℃保存,1个月。-80℃,保存3个月。 血浆样…

直播预告 | 实验太繁琐?蛋白浓度低?用一步法和高敏型ELISA

直播预告 省事省力少出错的ELISA到底该怎么做? 低表达的蛋白测不出来怎么办? 锁定【联科微课ELISA频道】 ELISA实验秘笈等你来 直播时间 2024年5月31日(星期五)13:30 直播内容 Part 1:联科生物EasyGo!™一步法ELISA试剂盒 ①EasyGo!™一步法ELISA与传统ELISA试剂盒的区别②EasyGo!™一步法ELISA的优势特点-----90分钟完成实验,只…

流式系列二 | 周期检测方法及常见问题一网打尽

01细胞周期检测方法(两种) 1、一步法活细胞检测 1.1样品制备,收集2×105-1×106个活细胞,离心弃上清,用PBS洗涤一次,离心弃上清 1.2复染,加入1 m L DNA staining solution(Cat#CCS01),涡旋振荡5 - 10秒混匀。室温避光孵育30分钟,进行流式检测。 2、活细胞/固定细胞检测 2.1可当天检测的活细胞样本 2.1.1收集2×105-1×106个…

ELISA系列 | ELISA检测TGF-β,样本该怎样活化?

TGF-β超家族简介 转化生长因子β(transforming growth factor β,TGF-β)是一类多效性细胞因子,在细胞增殖、分化、免疫调节及维持机体稳态等方面具有重要的作用。TGF-β包括三种不同的亚型:TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3。TGF-β信号通路的异常与多种疾病的发生发展密切相关,如癌症、纤维化和神经退行性疾病等。TGF-β1基因结构具有高度保守性,人和小鼠TG…

流式系列一 | 凋亡常见问题集合

流式凋亡实验常用Annexin V的方法检测,目前已有成熟的商业化的试剂盒,即使使用试剂盒若操作不当,在实验中也会遇到各种问题。在这里,小科汇总了实验中的常见问题,罗列了可能的原因和解决方案,希望能为大家解决疑惑。 实验结果出现实验组晚期凋亡细胞分两群,早期凋亡不明显时 实验结果图中出现正常细胞较多的裸核细胞 实验结果图中,核染(PI/7-AAD),几乎无阳性信号 实验结果分群不明显 结果发现实验…